Техника взятия основных видов биологического материала
Препараты высушивают («толстая капля» сохнет 2—3 часа) и доставляют в лабораторию в специальном планшете для хранения и транспортировки стекол с соблюдением необходимой осторожности. Посевы крови немедленно доставляют в лабораторию, оберегая от охлаждения.
Бактериологическая лаборатория при исследовании посевов крови выдает отрицательный ответ в случае, если рост микроорганизмов не обнаружен в течение 10 дней инкубации. В случае наличия у больного подозрения на внутрисосудистую инфекцию или бруцеллез возникает необходимость пролонгированной (до 1 месяца) инкубации посевов. Это должно быть особо отмечено в направлении. Рутинный посев крови не обеспечивает выявления ряда микроорганизмов.
Ликвор
Показания к проведению исследования: подозрение на нейроинфекцию. При подозрении на гнойный менингит в обязательном порядке в лабораторию направляют:
1. Ликвор для первичного посева, бактериоскопии и серологических исследований в количестве не менее 1,0 мл.
2. Ликвор в 0,1% полужидком агаре (среда «обогащения»).
3. «Толстая капля» крови для бактериоскопии.
4. Кровь в жидкой питательной среде или в 0,1% полужидком агаре (среда обогащения) для бактериологического накопления культуры: 5,0 мл крови засевают в 50,0 мл среды обогащения.
5. Кровь в количестве не менее 2-х мл для серологических исследований (РПГА, ВИЭФ, ЛА и др.).
Необходимое оснащение:
1. Игла для люмбальной пункции.
2. Мандрены.
3. Анестетик.
4. 70° этиловый спирт.
5. 2% или 5% настойка йода или другой антисептик, разрешенный к применению.
6. Перевязочный материал.
7. Стерильные пластиковые пробирки, лучше центрифужные с завинчивающимися крышками.
8. Шоколадный агар (желательно).
9. 0,1% полужидкий агар.
Взятие исследуемого материала:
Ликвор получают путем люмбальной пункции. Желательно взять материал сразу при поступлении больного в стационар, до начала лечения.
Пункция и взятие материала проводятся с соблюдением всех правил асептики, персонал работает в масках.
•Больной укладывается в положение на боку, головной конец кровати максимально опущен, голова прижата к груди, ноги — к животу, спина максимально согнута.
Определяются необходимые для выбора места пункции анатомические ориентиры. Пункцию проводят между поясничными позвонками L3-L4, L4-L5 или пояснично-крестцовыми L5-S1.
Обрабатывают область пункции сначала раствором антисептика, а затем 70° спиртом.
•Пальпируют рукой в стерильных перчатках точку пункции и вводят раствор анестетика.
Проводят пункцию иглой со вставленным мандреном до ощущения «провала».
Извлекают мандрен.
•Первую порцию ликвора берут в отдельную пробирку для проведения общего ликворологического исследования. Вторую порцию, предназначенную для бактериологического исследования, собирают в стерильную центрифужную пробирку с завинчивающейся крышкой.
Согласно МУК 4.2.1887—04 ликвор после пункции распределяют следующим образом:
· 1,0 мл направляют в клиническую лабораторию для проведения общего ликворологического и цитологического исследования;
· 0,2 мл направляют для постановки полимеразной цепной реакции (ПЦР);
· 1,0 мл направляют для первичного бактериологического посева (если не сделан в отделении при пункции), бактериоскопии и серологических исследований; для бактериологического и бактериоскопического исследований отбирается либо вторая порция ликвора, либо самая мутная из всех. Ее отбирают в стерильную, желательно центрифужную пробирку с завинчивающейся крышкой;